Penelitian tentang bakteri membutuhkan kerja yang cermat dengan berbagai peralatan dan instrumen. Agar mikroorganisme dapat berkembang biak secepat mungkin dalam kondisi laboratorium dan dapat mempertahankan aktivitas vital yang normal, digunakan media nutrisi khusus. Komposisi dan kondisi biofisiknya cocok untuk pertumbuhan aktif kultur bakteri.
Media nutrisi. Mikrobiologi dan aplikasi lainnya
Koloni bakteri ditumbuhkan di laboratorium pada cawan Petri yang berisi isi seperti jeli atau semi-cair. Ini adalah media nutrisi, yang komposisi dan sifatnya sedekat mungkin dengan media alami untuk pertumbuhan tanaman berkualitas tinggi.
Lingkungan seperti itu digunakan dalam penelitian mikrobiologi dan di laboratorium diagnostik medis. Yang terakhir paling sering bekerja dengan apusan bakteri patogen atau oportunistik, yang posisi sistematisnya ditentukan langsung di institusi.
Alami dan sintetisRabu
Aturan dasar bekerja dengan bakteri adalah pemilihan media nutrisi yang benar. Itu harus memenuhi berbagai kriteria, termasuk kandungan unsur mikro dan makro, enzim, nilai keasaman yang konstan, tekanan osmotik, dan bahkan persentase oksigen di udara.
Media bergizi diklasifikasikan menjadi dua kelompok besar:
- Lingkungan alam. Campuran semacam itu dibuat dari bahan-bahan alami. Ini mungkin air sungai, bagian tanaman, pupuk kandang, sayuran, jaringan tanaman dan hewan, ragi, dll. Lingkungan seperti itu dicirikan oleh kandungan bahan kimia alami yang tinggi, variasi yang mendorong pertumbuhan kultur bakteri. Terlepas dari keuntungan yang nyata ini, lingkungan alami tidak memungkinkan untuk penelitian khusus dengan jenis bakteri tertentu.
- Media sintetis. Mereka berbeda karena komposisi kimianya diketahui dalam rasio yang tepat dari semua konstituen. Media tersebut disiapkan untuk kultur bakteri tertentu, yang metabolismenya diketahui sebelumnya oleh peneliti. Sebenarnya, untuk alasan ini, dimungkinkan untuk menyiapkan lingkungan sintetis seperti itu untuk pengembangan mikroorganisme. Mereka digunakan untuk menganalisis aktivitas vital bakteri. Misalnya, Anda dapat mengetahui zat apa yang mereka lepaskan ke lingkungan dan berapa banyak. Mikroorganisme juga akan tumbuh di media alami, tetapi tidak mungkin untuk melacak perubahan kuantitatif dalam komposisi karena ketidaktahuan proporsi awal zat.
Diferensial-lingkungan diagnostik
Dalam bekerja dengan bakteri, tidak hanya media nutrisi biasa yang bisa digunakan. Mikrobiologi adalah ilmu yang luas, dan oleh karena itu, ketika melakukan penelitian, kadang-kadang perlu dilakukan pemilihan mikroorganisme karena alasan tertentu. Penggunaan media diagnostik diferensial di laboratorium memungkinkan untuk memilih koloni bakteri yang diinginkan pada cawan Petri sesuai dengan tanda biokimia aktivitas vitalnya.
Komposisi lingkungan seperti itu selalu menyertakan komponen berikut:
1. Nutrisi untuk pertumbuhan sel.
2. Substrat yang dianalisis (substansi).
3. Indikator yang akan memberikan warna khas ketika terjadi reaksi tertentu.
Contohnya adalah media nutrisi diagnostik diferensial "Endo". Ini digunakan untuk memilih koloni bakteri yang dapat memecah laktosa. Awalnya, media ini memiliki warna merah muda. Jika koloni mikroorganisme tidak mampu memecah laktosa, ia mengambil warna putih biasa. Jika bakteri dapat memecah substrat ini, mereka berubah menjadi warna merah cerah yang khas.
Rabu Pilihan
Laboratorium diagnostik sering bekerja dengan swab yang mengandung berbagai jenis bakteri. Jelas, untuk pekerjaan yang berkualitas, perlu untuk memilih koloni yang kita butuhkan dari lusinan orang luar. Di sinilah media pertumbuhan bakteri dapat membantu, yang secara ideal diformulasikan untuk mendukung hanya satu jenis mikroorganisme.
Misalnya,lingkungan elektif seperti itu hanya cocok untuk reproduksi Escherichia coli. Kemudian, dari menabur banyak bakteri pada cawan Petri, kita hanya akan melihat koloni Escherichia coli yang sama dan tidak lebih. Sebelum mulai bekerja, perlu diketahui metabolisme bakteri yang dipelajari dengan baik agar berhasil memilihnya dari campuran spesies lain.
Media kultur padat, semi padat dan cair
Bakteri dapat tumbuh tidak hanya pada substrat padat. Media nutrisi berbeda satu sama lain dalam keadaan agregasinya, yang tergantung pada komposisi selama pembuatan. Awalnya, mereka semua memiliki konsistensi cair, dan ketika gelatin atau agar-agar ditambahkan dalam persentase tertentu, campuran menjadi padat.
Media kultur cair biasanya ditemukan dalam tabung reaksi. Jika perlu untuk menumbuhkan bakteri dalam kondisi seperti itu, tambahkan larutan dengan sampel kultur dan tunggu 2-3 hari. Hasilnya bisa bermacam-macam: terbentuk endapan, muncul film, serpihan kecil mengapung, atau terbentuk larutan keruh.
Media kultur padat sering digunakan dalam penelitian mikrobiologi untuk mempelajari sifat-sifat koloni bakteri. Media tersebut selalu transparan atau tembus cahaya sehingga memungkinkan untuk menentukan warna dan bentuk kultur mikroorganisme dengan benar.
Persiapan media
Substrat seperti campuran daging-pepton yang berbahan dasar kaldu, agar-agar atau agar-agar sangat mudah disiapkan. Jika Anda perlu membuat substrat padat atau semi-cair, menjadi cairtambahkan 2-3% atau 0, 2-0, 3% gelatin atau agar-agar, masing-masing. Mereka memainkan peran utama dalam pengerasan campuran, tetapi mereka bukan sumber nutrisi. Dengan demikian, diperoleh media nutrisi yang sesuai untuk pertumbuhan kultur bakteri.
