Pengobatan modern memiliki metode diagnostik khusus yang memungkinkan untuk menetapkan etiologi penyakit pada manusia berdasarkan definisi patogen, zat asing secara genetik yang merangsang respons imun, asam nukleat, serta perubahan alergi dan kekebalan yang terjadi karena perbuatannya. Saat ini, RIA banyak digunakan dalam imunologi dan virologi, yaitu radioimmunoassay, tujuan pengaturan, komponen, kursus, akuntansi yang akan kita bahas dalam artikel ini. Tes ini mampu mendeteksi antigen sebagai hasil interaksinya dengan antibodi.
Definisi
RIA adalah metode untuk mendiagnosis zat aktif biologis dalam cairan, yang didasarkan pada reaksi antigen dengan antibodi saat menggunakan zat analog berlabel radionuklida yang memiliki sistem pengikatan khusus. Setelah interaksi merekakompleks imun terbentuk, yang dipisahkan dan radioaktivitasnya dipelajari. Diketahui bahwa radioimmunoassay dilakukan dengan menggunakan kit reagen standar.
Setiap reagen dapat menentukan konsentrasi satu zat tertentu. Cairan biologis yang diambil dari seseorang dicampur dengan reagen, setelah masa inkubasi zat radioaktif bebas dan terikat dipisahkan, kemudian dilakukan radiometri dan dihitung hasilnya. Isotop yodium digunakan untuk melabeli zat. Itu ditandai dan ditambahkan dalam jumlah tertentu.
Aplikasi
Analisis radioimun memiliki aplikasi yang luas dalam kedokteran dan mikrobiologi. Ini digunakan untuk mendiagnosis penyakit jantung dan pembuluh darah, penyakit endokrin dan sistem tubuh lainnya. RIA juga sering digunakan untuk mengidentifikasi penyebab infertilitas, patologi perkembangan janin. Dalam onkologi, analisis ini dilakukan untuk menentukan penanda neoplasma agar dapat memantau efektivitas pengobatan. Dalam imunologi, RIA digunakan untuk mempelajari keberadaan imunoglobulin, enzim, protein, dan sebagainya dalam darah. Hari ini, analisis ini memungkinkan Anda untuk mendeteksi konsentrasi berbagai hormon hingga sepersejuta satu gram. Dengan demikian, analisis darah radioimun banyak digunakan dalam kardiologi, onkologi, endokrinologi, ginekologi dan virologi.
Metode RIA
Adalah kebiasaan untuk membedakan antara beberapa metode analisis, tergantung pada sifatnyareaksi:
- Metode non-kompetitif dicirikan oleh komponen reaksi seperti antigen standar dan dapat dideteksi, larutan buffer, antibodi berlabel isotop, antibodi tertentu yang mengikat sorben. Antigen ditambahkan ke antibodi yang akan diuji. Setelah inkubasi, kompleks antigen-antibodi muncul, sorben dicuci, antibodi berlabel ditambahkan, yang mengikat antigen di kompleks. Radioaktivitas tergantung pada konsentrasi antigen yang diuji.
- Kompetisi radioimmunoassay didorong oleh kompetisi antigen. Di sini ada komponen reaksi seperti antigen kontrol dan ditentukan, larutan buffer, antibodi tertentu yang mengikat sorben, serta antigen berlabel isotop. Diagnosis dimulai dengan pengenalan antigen yang sedang diperiksa. Kompleks antigen-antibodi terbentuk pada sorben. Kemudian sorben dicuci, dan antigen berlabel disuntikkan. Dengan demikian, ia mengikat antibodi. Dengan bantuan counter, reaksi dan jumlah radioaktivitas diukur. Ini akan berbanding terbalik dengan jumlah antigen dalam sampel.
- Metode tidak langsung adalah yang paling umum. Dalam hal ini, radioimmunoassay dari komponen reaksi memiliki seperti serum kontrol dan uji, antigen atau antibodi yang terikat pada sorben, antibodi berlabel isotop, larutan buffer. Antibodi atau antigen yang terdiagnosis bereaksi dengan antigen atau antibodi yang terikat pada sorben. Kemudian inkubasi dikeluarkan, antibodi berlabel disuntikkan, yang mengikatkompleks antigen-antibodi.
Metodologi Analisis
Jadi, radioimmunoassay dilakukan dengan menggunakan reagen khusus. Set adalah standar, jadi kesalahan atau pelanggaran tidak diperbolehkan. Hasil diagnostik dapat diandalkan. Analisis dilakukan di pagi hari, untuk ini mereka mengambil darah vena dari seseorang. Di laboratorium, serum dipisahkan dari darah, yang akan digunakan untuk RIA. Serum ini dicampur dengan reagen. Campuran yang dihasilkan diinkubasi pada suhu tertentu dalam termostat.
Isotop bebas dan terikat dipisahkan dalam campuran yang dihasilkan. Setelah itu, bahan yang diterima diperiksa, dan hasilnya dihitung. Mekanisme radioimmunoassay memiliki beberapa pilihan. Teknik yang dijelaskan di atas adalah RIA fase cair, karena semua komponen berada dalam keadaan cair. Ada RIA dan fase padat, di mana antibodi ditempatkan dalam pembawa yang tidak larut dalam cairan.
Ketersediaan diagnostik
Penggunaan metode diagnostik ini dalam pengobatan semakin populer setiap tahun. Baru-baru ini, radioimmunoassay telah menjadi metode diagnostik standar yang dapat diresepkan oleh dokter saat membuat diagnosis akhir. Untuk waktu yang lama jenis analisis ini hanya dilakukan di laboratorium, hari ini telah menjadi metode penelitian yang umum. Tetapi RIA memerlukan penggunaan peralatan yang mahal (penghitung gamma), dan kit reagen memiliki masa pakai yang singkat. Semua ini adalah kelemahan utama dari analisis semacam itu, yang menentukanbiaya mahal.
Selain itu, RIA baru-baru ini mulai menggantikan metode penelitian yang lebih modern yang tidak memerlukan interaksi dengan isotop. Ini termasuk enzim immunoassay. Dengan demikian, RIA diinginkan di banyak klinik. Ini telah lama digunakan di kota-kota besar dan pusat-pusat diagnostik, tetapi di rumah sakit biasa di kota-kota kecil analisis ini praktis tidak digunakan karena biayanya yang tinggi.
Martabat RIA
Radioimmunoassay memiliki banyak keunggulan. Ini cukup spesifik dan memiliki sensitivitas tinggi, yang memungkinkan untuk menentukan keberadaan zat aktif biologis dalam jumlah yang sangat kecil. Analisis ini dilakukan dengan sangat sederhana, seseorang hanya diharuskan untuk mendonorkan darah vena. Hasil tes 100% akurat dan siap pada hari berikutnya. RIA juga dapat dengan mudah diotomatisasi. Dengan demikian, analisis ini memungkinkan Anda untuk mengidentifikasi protein yang merupakan produk limbah dari bakteri infeksius, yang menunjukkan adanya infeksi di dalam tubuh.
Diagnosis dalam Virologi
RIA yang paling menjanjikan adalah untuk virologi, karena memungkinkan Anda mengidentifikasi patogen virus dengan cepat. Hal ini disebabkan fakta bahwa dalam beberapa tahun terakhir kejadian berbagai infeksi telah berkembang, yang menyebar dengan kecepatan tinggi, menyebabkan kematian di antara orang-orang. Hal ini terutama berlaku untuk negara-negara yang tidak memiliki yang tinggipembangunan sosial dan ekonomi (negara-negara Timur Jauh), radioimmunoassay sangat diperlukan di sini. Mikrobiologi juga menggunakan metode diagnostik ini untuk mendeteksi penyakit menular yang disebabkan oleh bakteri patogen. Misalnya, RIA banyak digunakan untuk mendeteksi demam tifoid. Pada hari-hari pertama penyakit, sebelum penunjukan pengobatan, perlu dilakukan studi tentang tinja dan muntah. Namun, hasil diagnostik akan diperoleh setelah waktu yang lama. Di sini RIA datang untuk menyelamatkan, analisis memungkinkan Anda untuk mengidentifikasi agen penyebab penyakit dalam waktu singkat. Seseorang mendonorkan darah, keesokan harinya hasil penelitian sudah siap. Analisis ini membantu dalam membuat diagnosis yang akurat.
Hasil
Radioimmunoassay saat ini merupakan salah satu metode diagnostik yang paling sensitif. Hal ini digunakan untuk menganalisis zat terhadap antibodi yang dapat diperoleh. Metode ini memungkinkan untuk membuat banyak sampel dalam volume terkecil dari cairan yang diselidiki, serta mencatat hasilnya dalam waktu sesingkat mungkin, karena dapat sepenuhnya otomatis. Analisis ini dikembangkan pada 1950-an oleh Solomon Burson. Tiga puluh tahun kemudian, itu menyebar luas. Sampai saat ini, tidak ada alternatif seratus persen untuk RIA, karena analisisnya memiliki sensitivitas yang tinggi. RIA digunakan di berbagai cabang kedokteran, serta dalam mikrobiologi dan virologi.
Akhirnya
Penggunaan metode dalam virologi sangat relevan saat ini, karena memberikankemampuan untuk menyelidiki penyebaran infeksi, membuat diagnosis yang akurat dan meresepkan pengobatan khusus. Masalah ini sangat relevan untuk negara-negara yang memiliki tingkat ekonomi dan pembangunan sosial yang rendah. Juga, analisis ini memungkinkan Anda untuk mendeteksi jumlah hormon dan enzim dalam tubuh manusia. Untuk mendapatkan hasil yang dapat diandalkan, peneliti hanya perlu mendonorkan darah untuk analisis. Kedokteran tidak berhenti, seiring dengan radioimmunoassay, metode penelitian baru muncul, tetapi RIA terus menjadi salah satu pemimpin dalam diagnosa medis.
