Artikel ini akan dikhususkan untuk fenomena reaksi pengendapan. Di sini kita akan membahas ciri-ciri rumusan fenomena ini, fenomena difusi, ciri-ciri umum, peranannya dalam kehidupan manusia dan masih banyak lagi.
Pengantar fenomena
Presipitasi adalah fenomena tipe serologis, di mana antigen terlarut berinteraksi dengan antibodi dan, sebagai hasilnya, presipitasi diamati - endapan.
Karakteristik umum dari reaksi presipitasi adalah bentuk pengaruh terkoordinasi antigen dan antibodi. Jenis interaksi ini memungkinkan untuk menentukan keberadaan antigen yang tidak diketahui dalam zat uji dengan menambahkan antibodi dan antigen yang diketahui. Proses pengendapan tanpa adanya garam akan berlangsung lebih buruk, dan optimum terbaik terletak pada kisaran pH 7,0-7,4.
Konstituen reaksi
Ada tiga elemen utama di antara komponen reaksi pengendapan:
- Antigen yang memiliki sifat molekuler. Itu dalam kondisi tipe halus, dengan kata lain, itularut. Juga, antigen semacam itu disebut presipitogen, yang merupakan lisat atau ekstrak jaringan, dll. Precipitogen memiliki perbedaan karakteristik dari aglutinogen, yang terletak pada ukuran partikel yang menyusunnya. Aglutinogen memiliki ukuran sel yang melekat, dan presipitogen sepadan dengan ukuran molekul. Solusi antigen ditandai dengan transparansi.
- Antibodi yang ditemukan dalam serum darah manusia, serta dalam serum diagnostik imun, yang mengandung antibodi yang dipelajari.
- Elektrolit adalah larutan natrium klorida yang isotonik.
Produksi presipitogen
Menyiapkan reaksi presipitasi tidak mungkin tanpa presipitogen, yang diperoleh dengan menggiling bahan dan mengekstraksi antigen protein darinya. Ekstraksi terjadi dengan perebusan atau metode lainnya.
Lisat, serta ekstrak jaringan dan organ, serum darah, berbagai jenis filtrat berdasarkan biakan kaldu mikroba, serta ekstrak garam mikroorganisme dan zat autolisat, adalah hasil yang mencolok. contoh presipitogen.
Menyiapkan dalam presipitasi
Sekarang mari kita pertimbangkan metode pengaturan reaksi pengendapan.
Reaksi pengendapan cincin dilakukan, yang berlangsung di tabung reaksi yang disiapkan khusus. Serum dimasukkan ke dalam rongga piring, menuangkannya ke dinding dengan bantuan cerat pipet. Selanjutnya, jumlah yang tepat dari pengendapan secara hati-hati dilapisi di atas, dan kemudian tabung dibawa ke posisi vertikal dari posisi horizontal. Menyiapkan dan memperhitungkan reaksi pengendapan adalah operasi yang sangat teliti. Hasilnya dicatat setelah munculnya cincin putih di perbatasan antara antigen dan antibodi. Jika unsur-unsur reaksi yang bereaksi sesuai satu sama lain, maka mereka mengikat, tetapi ini menjadi terlihat setelah interaksi mereka dalam waktu yang lama.
Reaksi pengendapan juga dilakukan dalam cawan Petri atau di atas gelas slide, di mana gel agar ditransfer, menerapkannya dalam lapisan kecil. Setelah mengeras dalam gel, sejumlah kecil lubang dipotong di mana antigen dan antibodi akan ditempatkan. Ada dua cara untuk melakukan tindakan ini: metode imunodifusi radial dan imunodifusi ganda.
Informasi umum
Mekanika kerja presipitasi mirip dengan perangkat aglutinasi. Di bawah pengaruh serum tipe imun, antigen, yang telah masuk ke dalam reaksi, mengurangi tingkat dispersinya. Kondisi penting adalah transparansi serum dan antigen.
Anda dapat meningkatkan registrasi reaksi jika Anda menempatkan antigen pada antibodi. Akibatnya, munculnya endapan dalam bentuk cincin dapat diamati. Fenomena ini disebut presipitasi cincin dan dilakukan dalam tabung khusus dengan diameter 2,5 hingga 3,5 mm. Salah satu contoh paling umum dari reaksi presipitasi adalah diagnosis antraks.
Presipitasi memungkinkan untuk menentukan tingkat toksigenitas kultur difteri dalam agar.
Selama reaksi yang dipertimbangkanpengendapan kompleks antigenik dan antibodi terjadi. Curah hujan adalah fenomena imunologi yang memungkinkan Anda menentukan jumlah antibodi dalam serum darah orang dan hewan yang sakit atau divaksinasi.
Konsekuensi Titrasi
Penting untuk diketahui bahwa data yang diperoleh dari titrasi metode di atas tidak dapat diukur. Untuk membuat dan menganalisis penilaian kuantitatif jumlah antibodi yang terkandung, teknik reaksi khusus dikembangkan oleh M. Heidelberger dan E. Kabat, yang didasarkan pada pencarian dan identifikasi zona ekivalen. Mencampur jumlah usia antigen dengan volume antiserum yang konstan menyebabkan peningkatan endapan yang awalnya terbentuk, dan kemudian menurun lagi karena peningkatan kemampuan untuk melarutkan kompleks antigen. Dengan menentukan jumlah antibodi dalam supernatan yang terkandung dalam setiap tabung, Anda dapat menemukan bahwa sejumlah cawan dengan antibodi akan kehilangan cairan. Di sini, dibandingkan dengan tabung reaksi lainnya, endapan terbesar akan terbentuk. Karena ini dan pengurangan presipitat protein antigenik dari nilai total protein, adalah mungkin untuk mendapatkan nilai pasti dari antibodi yang terkandung dalam volume serum spesifik yang sedang dipelajari. Selanjutnya, jumlah molekul protein dari endapan ditentukan oleh jumlah nitrogen atau menggunakan metode kolorimetri.
Evaluasi nilai
Estimasi nilai presipitasi dalam metodologi diagnostik harus mempertimbangkan kemungkinan adanya antibodi yang tidak memiliki sifat presipitin dalam serum imun, yang darinya endapan itu sendiri mungkin tidak terbentuk setelah bereaksi dengan antigen. Daftar molekul tersebut termasuk antibodi tidak lengkap dan beberapa spesies dari kelompok globulin gamma-A.
Reaksi pengendapan dalam kondisi laboratorium menemukan penerapannya dalam berbagai jenis modifikasi. Misalnya, reaksi termopresipitasi digunakan untuk mendeteksi antigen bakteri botulisme, antraks, dll., yang tidak mengalami denaturasi termal. Tidak seperti presipitasi cincin, jenis reaksi ini menggunakan filtrat bahan yang bersangkutan dalam keadaan mendidih.
Analisis reaksi presipitasi dalam campuran kompleks tidak memungkinkan seseorang untuk mengkarakterisasi sifat-sifat elemen individu campuran. Dalam kasus seperti itu, seseorang menggunakan metode pengendapan dalam agar-agar, dan juga menggunakan imunoelektroferesis.
Hujan difus
Dalam bidang penelitian ini, ada konsep reaksi presipitasi difus (RPD). Hal ini didasarkan pada kemampuan untuk berdifusi dalam gel antibodi dan antigen terlarut. Difusi adalah kemampuan molekul zat tertentu untuk menembus molekul zat lain, yang disebabkan oleh pergerakan termal.
Gel adalah sistem tipe terdispersi di mana fase cair didistribusikan secara merata dalam fase padat. Paling sering, gel agar digunakan untuk reaksi seperti itu.
Setelah memberikan parameter, dalamkondisi di mana molekul dapat berdifusi terhadap satu sama lain, pertemuan mereka akan disertai dengan pembentukan kompleks antigen + antibodi. Neoplasma semacam itu dapat berdifusi, berada di dalam gel itu sendiri, dan akan mengendap, berbentuk strip yang dapat dideteksi dengan mata telanjang. Jika antigen dan antibodi homolog, tidak ada pita yang akan terbentuk.
Menciptakan kondisi di mana difusi akan berlangsung saat berada di lapisan agar melibatkan penuangan komponen, tetapi jumlah total sumur dan posisi relatifnya ditentukan oleh jenis tugas yang diperlukan memutuskan. RPD memberi seseorang kemampuan untuk mendeteksi dan mengidentifikasi virus terisolasi yang tidak diketahui dengan menguji menggunakan serum antibodi yang diketahui.
Aplikasi
Hujan banyak digunakan tidak hanya dalam diagnosis penyakit, tetapi juga menemukan penerapannya dalam pemeriksaan medis forensik. Sulit membayangkan analisis yang memungkinkan untuk menentukan spesies darah, bagian dari organ atau jaringan yang ditemukan pada senjata kejahatan yang tidak menggunakan reaksi pengendapan. Selama proses ini, serum pengendap digunakan, yang diperoleh dengan mengimunisasi berbagai hewan dan burung. Penting bahwa tingkat titer serum tidak kurang dari 1:10000, dan juga harus memiliki spesifisitas yang cukup. Dari bercak darah atau kerak yang terdeteksi, dibuat ekstrak untuk pemeriksaan fisik. solusi, yang akan diekspos lebih lanjut keserum pengental. Menurut reaksi ini, adalah mungkin untuk menetapkan jenis protein jaringan dan organ baik manusia maupun hewan. Memperoleh ekstrak keruh memaksa seseorang untuk menggunakan pengendapan pada agar-agar.
Kesimpulan
Menganalisis informasi yang dibaca, kita dapat menyimpulkan bahwa reaksi pengendapan sangat penting bagi seseorang, karena memungkinkan mendiagnosis berbagai antigen menggunakan antibodi, fenomena ini juga banyak digunakan dalam pemeriksaan medis forensik dan memungkinkan Anda mengidentifikasi jenis darah, jaringan atau organ dalam kaitannya dengan subjek tertentu. Ada beberapa jenis dan metode pengendapan, yang digunakan sesuai dengan kebutuhan yang muncul dari masalah yang sedang dipecahkan.
