Kaldu selenit adalah media pengayaan dengan sifat selektif, dirancang untuk mengisolasi bakteri patogen dari genus Salmonella (lat. Salmonella). Sangat efektif jika perlu untuk mendeteksi patogen khusus ini di antara perwakilan mikroflora usus lainnya. Media ini digunakan untuk keperluan diagnostik klinis dan sanitasi dalam pengujian makanan.
Karakteristik umum
Kaldu selenite dibuat berdasarkan bubuk, yang merupakan campuran homogen dari berbagai komponen komposisi. Warna bahan kering mungkin kuning muda atau krem, tergantung pada jenis medianya. Bubuk memiliki sifat mengalir bebas.
Siap kaldu selenite adalah media transparan cair berwarna kuning muda. Massa ini dituangkan ke dalam wadah tempat penaburan dilakukan untuk inkubasi lebih lanjut.
Ada tiga jenis utama kaldu selenite:
- media murni - cocok untuk isolasi Salmonella dari bahan klinis dan sanitasi;
- dengan penambahan manitol (kaldu dua komponen) - dirancang untuk bekerja dengan bahan klinis saja;
- media sistein-selenit - dapat digunakan untuk mengisolasi Salmonella dari biomaterial pasien patologis (feses, urin, dll).
Tipe ini sedikit berbeda dalam komposisi dan fitur aksi.
Tugas utama kaldu selenite adalah untuk mempromosikan akumulasi salmonella, menghambat pertumbuhan mikroflora yang menyertainya. Ini memungkinkan tidak hanya untuk mendeteksi patogen dalam bahan, tetapi juga kemudian mentransfernya ke agar. Media ini dikembangkan oleh Leifler, yang pertama kali menemukan efek selektif selenit terhadap Salmonella.
Komposisi
kaldu selenite mengandung:
- kasein hidrolisat;
- laktosa;
- natrium fosfat;
- natrium hidroselenit.
Medium selenit-sistein, selain komponen ini, mengandung L-sistein dan natrium hidrogen fosfat. Komposisi kaldu manitol berbeda karena alih-alih kasein hidrolisat, itu termasuk pencernaan peptik jaringan hewan. Tidak ada laktosa di lingkungan seperti itu, tetapi ada manitol. Yang terakhir bertindak sebagai substrat yang dapat difermentasi dan memberikan sifat penyangga kaldu.
Semua komponen bubuk, kecuali natrium hidroselenit, secara kondisional disebut bagian A, dan zat selektif disebut bagian B.
Prinsip operasi dan sifat lingkungan
kaldu selenite berfungsi sebagai media penyimpanandengan tindakan selektif. Efek selektif disediakan karena toksisitas selenite, yang menghambat pertumbuhan sebagian besar mikroorganisme. Pada saat yang sama, bakteri dari genus Salmonella mampu mengembalikan senyawa ini, sehingga menghilangkan efek toksik pada sel mereka sendiri. Namun, sebagai hasil dari reaksi, alkali terbentuk, yang mengurangi efek merugikan selenit pada pertumbuhan mikroflora terkait, dan oleh karena itu perlu untuk menstabilkan pH. Fungsi ini dilakukan oleh bakteri yang memfermentasi laktosa dengan pembentukan asam. Penyangga media disediakan oleh fosfat.
Dalam kaldu dua komponen, pH distabilkan oleh manitol. Media sistein meningkatkan efek selektif terhadap Salmonella. Kaldu seperti itu efektif untuk mengendalikan latar belakang infeksi pada pasien dengan stadium penyakit non-akut atau pemulihan.
Manifestasi karakteristik pertumbuhan strain referensi dalam media dapat diamati setelah 12-24 jam dari awal inkubasi. Dalam hal ini, Salmonella membentuk koloni tidak berwarna.
Fitur Memasak
Persiapan medium dilakukan dalam dua tahap. Pertama, larutan dibuat dengan komponen selektif dengan laju 4 gram natrium selenit per liter air suling. Kemudian tambahkan 19 gram bubuk utama (bagian A). Solusinya dicampur secara menyeluruh dan dipanaskan sampai partikel benar-benar larut, setelah itu dituangkan ke dalam tabung reaksi steril.
Saat memasak, penting untuk diikutirezim suhu, karena media tidak stabil terhadap panas berlebih. Sterilisasi kaldu hanya dapat dilakukan dalam penangas air atau menggunakan semburan uap. Autoklaf media sangat dilarang.
